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Fiche 27 : TRICHROME DE MASSON

Technique

Déparaffinage Eau courante Mordancer dans le Bouin pendant 1 h. à 56° Rincer à l’eau

• Coloration à l’Hémalun (ou Hématoxyline de Harris) (1 min. 30) Lavage à l’eau courante

• Différenciation rapide dans l’alcool chlorhydrique Lavage à l’eau Bleuir à l’eau lithinée Lavage à l’eau Rinçage dans l’eau acétifiée à 1% • Plonger les coupes dans un mélange de Ponceau Fuchsine * dilué à 1 pour 5 dans de l’eau acétifiée, pendant 5 min. Rinçage à l’eau acétifiée • Plonger les coupes dans l’acide phosphomolybdique à 1% dans l’eau distillée, pendant 10 min., pour différencier Rinçage à l’eau acétifiée • Contre-coloration par Vert-Lumière * ou Bleu d’Aniline * pendant 1 min. (maxi 2 min.) et contrôle. Lavage à l’eau Deshydratation à l’alcool absolu Xylènes Montage

Résultats

Noyaux bleus-noirs Mucus bleu ou vert Cytoplasmes [roses à rouge Kératine rouge vif Hématies rouges vifs Collagène bleu ou vert Fibres élastiques roses (selon le colorant utilisé)

Réactifs

Eau Acétifiée à 1%

Mélange Ponceau-Fuchsine (se prépare à l’avance et se conserve indéfiniment)

a - Solution de Fuchsine * 1 partie b - Solution de Ponceau * 2 parties

a - Fuchsine acide : 1 g b - Ponceau de Xylidine  : 1 g - Eau distillée 100 ml - Eau distillée 100 ml - Acide acétique 0,5 ml - Acide acétique 0,5 ml • Vert Lumière 1 ml - Eau distillée 100 ml - Acide acétique 0,5 ml • Bleu d’Aniline 1 ml - Eau distillée 100 ml - Acide acétique glacial 0,5 ml

Remarques

Le bleu d’aniline, plus empâté, permet une meilleure visualisation des fines fibrilles de collagène. Le vert lumière, plus léger, convient mieux aux biopsies rénales et digestives. Il passe plus vite à la lumière.

 

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